1、什么是TCR？

組織交叉反應(yīng)（Tissue Cross-Reactivity）是在體外檢測抗體藥物與組織上的抗原表位結(jié)合的試驗。目的是確認受試抗體與藥效靶組織抗原表位的結(jié)合，檢測抗體是否與非靶部位組織抗原結(jié)合，為確定非臨床安全性試驗相關(guān)動物種屬及預(yù)測毒性靶器官提供參考。

2、為什么要做TCR？

抗體藥物具有免疫特性，除了與把抗原結(jié)合外，如果人體正常組織中存在相同或相似的抗原表位，還會與靶器官外的其他組織細胞結(jié)合從而產(chǎn)生嚴(yán)重的不良反應(yīng)。

因此，進行TCR試驗是抗體藥物臨床前安全性評價的重要組成部分，對于抗體藥物的研發(fā)至關(guān)重要，也是國內(nèi)外監(jiān)管機構(gòu)的要求。

3、TCR試驗的核心技術(shù)是？

免疫組織化學(xué)技術(shù)（IHC，immunohistochemistry）。采用冰凍或固定組織標(biāo)本，切片，并用帶顯色劑標(biāo)記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng)對組織染色，對相應(yīng)抗原進行定性、定位、定量測定的一項技術(shù)。

4、試驗所需的人體器官組織從哪里來呢？

捐獻人體組織、手術(shù)取組織、胎盤組織、細胞系、商業(yè)化人體組織芯片。

5、如何正確的處理新鮮的組織？

將新鮮的組織進行冰凍，不建議使用化學(xué)固定法。

冰凍時要注意迅速冷凍，盡量避免緩凍或者反復(fù)凍融，會在組織中形成冰晶，破壞組織，也給后面的試驗帶來觀察障礙。

6、如何判斷我的病理切片是否封閉好了？

利用抗轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體對組織進行染色。若組織切片中的血細胞呈淡淡的黃褐色，那么表明切片封閉好了。

7、組化染色時何時選擇一步法（直接法）？

一步法是將生物素標(biāo)記與一抗偶聯(lián)，只需要一步免疫組化反應(yīng)便完成染色的方法。這種方法避免了二抗的非特異性染色，減少了干擾。但是由于一抗與生物素的結(jié)合，很有可能會破壞了一抗的空間結(jié)構(gòu)，尤其是抗體抗原結(jié)合位點，造成假陰性或假陽性。

8、TCR試驗當(dāng)中經(jīng)常會碰到的問題有哪些？

• 假陽性/假陰性

• 脫片

• 非特異性染色

• 邊緣效應(yīng)

• “陰陽臉”

• 。。。

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